许多不孕不育症的原因都是在男方的身上。而因为精子的问题造成不孕不育是其中常见的病因。抗精子抗体就是精子的一个“毒物”。他让精子的质量变差，导致精子不能和卵子结合，孕育出生命。
抗精子抗体与精子结合后，在补体参与下，可导致精子制动和死亡，利用台盼蓝或伊红Y等染料使死精子染色，间接验证血清或分泌液中是否有制动精子的抗体存在。
（一)台盼蓝染色法
【准备】
（1)待检血清的分离和灭活补体。
（2) AB血型人血清（补体)制备。
（3) 2%台盼蓝液配制（用蒸馏水)。
（4)台盼蓝-生理盐水溶液配制：取适量生理盐水，加等体积2%台盼蓝水溶液，混匀即可。
（5)配制0.01 mol/L，pH 7.4 PBS溶液。
【方法】
（1)取正常新鲜精液【精子浓度为（40～100)×106/mL】用pH7.4 PBS作1∶10稀释，以500r/min 30min离心洗涤一次，弃去上清，沉渣用PBS调整精子浓度为100×106/mL的精子悬液。
（2)在小试管内加入1滴待检血清，1滴精子悬液和2滴补体血清。置37摄氏度孵育，并于30min、60min分别追加2滴补体血清，直至90min后加入1滴台盼蓝生理盐水溶液，继续孵育60min，取出小试管，以500r/min，30min离心，弃去上清，将沉渣涂片，待干燥后镜下观察。以阴性血清作对照组，以同样条件和方法处理
（3)计数：对照组：记录数至100个无染色精子（活精子)时所需的总精子数（含100个无染色精子加一定数量染色的死精子)。实验组：记录对照组相应的总精子数，把其中所含的无染色精子（活精子)数作X。将100-X所得的数目，即为被检血致死的精子数，这个数目称为精子毒性指数（STI)。
【判断】
STI>25时，P≤0.01，判为阳性。STI在15～20之间，判为可疑。STI<15时，判为阴性。本法所得阳性率与精子制动试验的阳性率较为一致。
（二)伊红Y染色法
【准备】
（1)用蒸馏水配制4%伊红Y染液。
（2)配制0.01mol/L，pH7.4 PBS溶液。
【方法】
（1)取正常新鲜精液（精子浓度宜大于：60×106/mL)，用pH 7.4的PBS洗涤3次，调整精子浓度为10×107/mL。
（2)取精子悬液16μL，移置载玻板的漆孔内，分别设2个测定和对照孔，另取待检血清20μL，补体血清4μL加入测定孔内，对照孔只加待测血清不加补体，充分混匀。
（3)把玻板移入湿盒内，在37摄氏度孵育30min，每孔加4%伊红Y 4μL，加上盖玻片使其作用2min，进行镜检。
【判断】
由于活精子不着色，死精子着染为红色，计算200个精子中，死精子所占的百分数，减去对照组死精子的百分数，即为抗体杀灭精子的百分率。以杀灭精子≥10%以上者为阳性。
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